期刊简介

               主要介绍肿瘤学基础理论研究的新成果、新进展、新方法;肿瘤临床科研成果、工作经验;有关肿瘤防治的调查统计;抗癌新药研究成果;中西医结合防治肿瘤的研究成果、经验交流;肿瘤研究最新进展的综述、讲座等。本刊国内外公开发行,已被多家专业数据库收录。                

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  • 杂志名称:肿瘤基础与临床杂志
  • 主管单位:河南省科学技术协会
  • 主办单位:河南省抗癌协会,郑州大学,河南省肿瘤医院,河南省肿瘤研究所
  • 国际刊号:1673-5412
  • 国内刊号:41-1383/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:河南省首届优秀科技期刊奖期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
肿瘤基础与临床杂志2014年第03期

食管癌细胞Eca9706 DNA聚合酶β基因敲除载体的构建

冯龙;郭文涛;路武豪;孙萨迦;董子明

关键词:基因敲除, DNA聚合酶, 打靶载体, ECA9706细胞
摘要:目的:构建食管癌细胞Eca9706 DNA聚合酶β( DNA polβ)基因敲除载体,为DNA polβ基因敲除奠定基础。方法应用体细胞基因敲除技术的方法和原理,根据DNA polβ基因序列,设计并合成2对特异性引物(UP1/UP2和DOWN1/DOWN2),通过PCR扩增获得上游同源序列(UP)和下游同源序列(DOWN),其中上游同源序列长1268 bp,下游同源序列长2150 bp,将其插入骨架载体pcDNA3.1,从而构建了DNA polβ基因敲除载体pOUT-polβ,后用PCR、酶切和测序进行鉴定。结果经过PCR筛选,限制性酶切及DNA测序鉴定,证实上游同源序列( UP)和下游同源序列( DOWN)2个片段插入正确。结论通过本研究所述方法,成功构建了用于食管癌细胞Eca9706 DNA polβ基因敲除载体pOUT-polβ。