期刊简介
主要介绍肿瘤学基础理论研究的新成果、新进展、新方法；肿瘤临床科研成果、工作经验；有关肿瘤防治的调查统计；抗癌新药研究成果；中西医结合防治肿瘤的研究成果、经验交流；肿瘤研究最新进展的综述、讲座等。本刊国内外公开发行，已被多家专业数据库收录。
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首页>肿瘤基础与临床杂志
- 杂志名称：肿瘤基础与临床杂志
- 主管单位：河南省科学技术协会
- 主办单位：河南省抗癌协会,郑州大学,河南省肿瘤医院,河南省肿瘤研究所
- 国际刊号：1673-5412
- 国内刊号：41-1383/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：河南省首届优秀科技期刊奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
重组SV40大T抗原慢病毒表达载体的构建
李培杰；赵国强
关键词：SV40大T抗原, 慢病毒载体, 细胞永生化
摘要：目的 构建含有重组SV40大T抗原基因的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag,转染真核细胞Eca-9706并检测SV40大T抗原基因在真核细胞内的表达.方法 以PCR方法从含有SV40大T抗原基凶的质粒上扩增出SV40大T抗原基因作为靶基因;将其连接至pGEM-T Easy载体上,并对靶基因进行DNA测序确认;再将靶基因与慢病毒表达载体pLentiGFP重组构建成为PLentiGFP-Tag;以脂质体介导转染真核细胞Eca-9706,观察慢病毒表达载体所携带的GFP基闪在细胞内的表达,使用RT-PCR检测SV40大T抗原基因在细胞内的表达水平.结果 成功克隆SV40大T抗原基因,经由DNA测序确认;成功筛选出含SV40大T抗原基因正插子的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag;转染真核细胞Eca-9706后48 h,观察到绿色荧光的广泛表达并检测出宿主细胞内高效表达的SV40大T抗原mRNA.结论 成功构建含SV40大T抗原基因的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag,并观察到SV40大T抗原在真核细胞中的成功表达.
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