期刊简介
主要介绍肿瘤学基础理论研究的新成果、新进展、新方法；肿瘤临床科研成果、工作经验；有关肿瘤防治的调查统计；抗癌新药研究成果；中西医结合防治肿瘤的研究成果、经验交流；肿瘤研究最新进展的综述、讲座等。本刊国内外公开发行，已被多家专业数据库收录。
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首页>肿瘤基础与临床杂志
- 杂志名称：肿瘤基础与临床杂志
- 主管单位：河南省科学技术协会
- 主办单位：河南省抗癌协会,郑州大学,河南省肿瘤医院,河南省肿瘤研究所
- 国际刊号：1673-5412
- 国内刊号：41-1383/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：河南省首届优秀科技期刊奖期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
TAp73γ在Saos-2细胞中定量诱导体系的建立
郑湘予；庞霞；张岚；陈奎生
关键词：Tet-On, 基因表达系统, TAp73γ, Saos-2
摘要：目的利用Tet-On基因表达系统建立Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,通过强力霉素(Doxycycline,Dox)定量诱导TAp73γ基因的表达.方法将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-TAp73γ分别转染PT67细胞,产生相应的逆转录病毒.RevTet-On病毒感染Saos-2细胞,经G418选择培养基进行培养并感染RevTRE-Luc,再应用荧光素酶活性检测筛选出高诱导倍数的Saos-2/Tet-On细胞克隆.后该细胞株感染RevTRE-TAp73γ病毒,用强力霉素筛选出阳性细胞,在不同浓度Dox诱导下用Western blot分析Saos-2/RevTet-On/TAp73γ细胞中TAp73γ的表达.结果 Saos-2/RevTet-On克隆5当培养基中Dox浓度达到2.5mg/L时,荧光素酶相对活性值为5.3×106RLU/s,去除Dox时荧光素酶活性弱,背景低.Western blot结果显示在Saos-2/Tet-On 5细胞中TAp73γ蛋白表达随着Dox浓度的增加而增加.结论建立了Saos-2/Tet-On及Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,可利用四环素衍生物定时定量调整Saos-2细胞中TAp73γ基因的表达,为研究TAp73γ细胞内协同作用因子、进一步阐明细胞内p73蛋白的生物学行为提供了一个理想的研究平台.
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